透明质酸酶基因工程制备及在透明质酸寡糖制备中的应用

发布时间:2024-01-30
1.所属领域:
 生物工程领域,主要涉及基因工程、代谢工程等专业领域。
2.成果用途:
 用于将大分子量的透明质酸降解成小分子量透明质酸或寡聚透明质酸。
3.项目背景:
 化学法降解透明质酸存在容易破坏透明质酸分子结构、杂质高等问题,且降解周期长,一般为12-15天。酶法降解透明质酸解决了透明质酸降解难的难题,不会破坏透明质酸结构,且降解周期缩短至数小时,实现了大幅度降本增效,且能精准的控制透明质酸的分子量,拓展了透明质酸的应用空间。
4.技术优势:
 课题组构建的一株大肠杆菌基因工程菌株,可实现胞外可溶性表达方式制备细菌HAase,便于目的蛋白的纯化,发酵48小时胞外酶活高达5.3*104U/ml,目的蛋白产量达14g/L,适合大规模生产。本重组HAase比活高达3800U/mg,降解HA效率达99%以上,得到o-HA产物主要为o-HA2及o-HA4含量分别为46%和31%,另有少量o-HA6(16%)及o-HA8(7%),产物分子量明确,回收工艺简单高效。
5.市场前景:
 酶切法能够把透明质酸精准地切成不同的分子量大小,大大打开透明质酸的应用空间,拓展了透明质酸的应用场景,在化妆品、食品等领域具有广泛的市场和丰厚的收益。
6.技术成熟度:
 完成小试工艺研究。
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